tdt是什么意思

TDT是末端脱氧核苷酸转移酶的意思,全称是terminal deoxyribonucleotidyl transferase,简称末端转移酶,通常自牛胸腺和骨髓中分离提取,是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TDT的底物。

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“末端转移酶”催化的加上核苷酸至DNA分子的3'末端。不像大多数的DNA聚合酶,它不需要一个模板。这种酶的优选底物是3'突出端,但它也可以添加核苷酸至钝末端或凹陷的3'末端。钴是一种必要的辅因子,但是在酶催化后反应在的镁和锰施用体外。

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末端转移酶的主要用途包括:

1、给载体或CDNA加上互补的同聚尾,用于建立体外重组DNA分子时在DNA片段末端加上一个同聚物尾巴,两种不同的DNA分子加上不同的但可以互补的即A和T、C和G的尾巴后,经过退火或复性,两种尾巴便可以借助互补作用连接在一起。在CDNA文库建立时,这种加尾方法是使CDNA插人载体中的常用方法之一。

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2、用于DNA片段3'末端的放射性核素标记。末端转移酶在Mg2+存在的条件下,选择3'-OH端单链DNA为引物加成核苷酸,在CO2+存在的条件下,选择3'-OH端双链DNA为引物加成核苷酸,形成多聚核苷酸尾。如果在反应系统中加人核素标记的核苷酸,那么便可得到3'端标记的DNA分子。该法常用于核酸末端标记和核酸连接的互补多聚尾。

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